Bücherei
Regal 1
Die bisherigen Methoden vermögen
durchweg nicht
eindeutig
zu
beweisen, daß es sich bei dem im Harn von
Diabetikern
enthaltenen Stoff sicher um Glucose handelt, da
auch
andere
Stoffe süß schmecken, reduzierende
Gruppen
enthalten bzw. die
Ebene des polarisierten Lichtes um einen
bestimmten
Winkel
drehen.
Um Substanzgemische zu trennen und ihre
Bestandteile
zu
identifizieren eignet sich besonders die
chromatographische
Methode, da der RF-Wert einer Substanz sehr
charakteristisch
für diese ist. Die Identifikation wird
dadurch
erreicht,
daß
man reine Vergleichssubstanz mitlaufen
läßt.
Zum Nachweis bzw.
zur Sichtbarmachung kann eine chemische Methode
z.B.
ein
Nachweis reduzierender Gruppen dienen, wodurch der
"Kreis
der
Verdächtigen" von vornherein
eingeschränkt
wird.
Entfernung Startpunkt bis Fleckmittelpunkt
RF Wert =
------------------------------------------
Entfernung Startpunkt Fließmittelfront
Für meine Versuche wählte ich
die
Zirkularmethode,
einen
Spezialfall der Rundfiltermethode.
Bei der Rundfiltermethode wird das
Fließmittel
dem
waagerecht
liegenden Papier in einem Punkt, z.B. durch einen
Docht,
zugeführt. Das Substanzgemisch, das man
trennen
will, wird in
diesem Punkt oder in einem Kreis um diesen Punkt
aufgetragen.
Sie verteilt sich schließlich während
des
Chromatograpierens
auf einen Kreis um diesen Punkt. Bei der
Zirkularmethode
teilt
man den Kreis in verschiedene Sektoren ein, so
daß
man in den
verschiedenen Sektoren verschiedene
Substanzgemische
und die
Reinsubstanz zum Vergleich unabhängig
voneinander
laufen lassen
kann.
Schematisch sieht dies ungefähr
folgendermaßen
aus.

S1 - S3 = Substanzgemisch O = Ausgangspunkt Fließmittel
S4 =Reinsubstanz
Nach diesem Schema enthält S1 die
Reinsubstanz
S4.
S3 enthält eine Substanz mit ähnlichem
chemischen
Charakter.
Für meine Versuche verwendete ich folgende Geräte.
a) Chromatographiepapier
Bei den Papieren Nr. 2040 läuft das
Fließmittel
schnell, bei
denen der Nr. 2043 mittelschnell, bei Nr. 2045
langsam.
Je
langsamer das Fließmittel läuft, desto
schärfer
ist die
Trennung.
Die "b" Papiere haben ein großes
Flächengewicht
(g/cm2)
daher eine große Naßfestigkeit, was
bei der
Herausnahme eines
durchgefeuchteten Papieres von Bedeutung ist.
"Mgl" bedeutet ein bereits
oberflächenglatt von
der
Langsiebmaschine kommendes Papier, das in der
Laufrichtung
60
cm in der Querrichtung 58 cm breit ist.
Ich verwendete das Papier Nr. 2043 b Mgl,
welches
für
gewöhnliche Trennung empfohlen wird und mit
welchem
man auch in
Schulversuchen arbeitet. Firma Schleicher u.
Schull,
Marke
Selectra (14,5 cm Durchmesser mit Radialschlitzen).
b) Fließmittel
Alpha) N Butanol CH3 (CH2)3 OH
Beta) Eisessig CH3 COOH (Essigsäure 100%)
Gamma) H2O
Alpha : Beta : Gamma = 4 : 1 : 5 = 20 ccm :3 ccm : 25 ccm
c) Vergleichslösung
1g Glucose in Meßkolben mit 70 ml
aqua dest
auflösen,
20ml abs.
Äthanol zufügen ad 100ml auffüllen.
d) Sichtbarmachung
Durch Aufsprühen von Fehling'scher
Lösung
mit
Parfümzerstäuber.
Danach 15 min in Trockenschrank erwärmen bei
ca.
100o C.
e) Weitere Geräte
1. 2 Petrischalen 14 cm Durchmesser mit
ca. 60 ml
Fließmittelmenge.
2. Glaskapillaren ca. 6 cm lang zum
auftragen der
Substanzflecken (leicht herzustellen durch
ausziehen
von über Bunsenbrennerflamme erhitztem
Glasrohr).
3. Als Docht aufgedrilltes Stück Chromatograpierpapier.
f) Laufzeit
Die Laufzeit schwankte bei den einzelnen
Versuchen
zwischen
1h
20 min und 1h 50 min bei einer Raumtemperatur von
ca.
24o C.
g) RF - Wert
Anilinphihalat als Sprühreagenz
für
Chromatographie
von Merk
eignete sich besser für den Glucosenachweis
als
die zu Anfang
verwendete Fehling'sche Lösung. Ich
verwendete
daher
für die
weiteren Versuche diesen Indikator.
Unter Zuhilfenahme der chromatographischen
Methode
gelang
es
mir schließlich, die im Harn des Diabetikers
enthaltene
Substanz eindeutig als Glucose zu identifizieren..
Es ergab sich ein durchschnittlicher RF-Wert von
1,85.
Für die tägliche Harn- bzw
Blutzuckerbestimmung
ist diese
Methode jedoch vollkommen ungeeignet,
Zunächst
einmal,
weil sie
zuviel Zeit in Anspruch nimmt, Laufzeit zwischen
1h 20
min und
1h 50 min und außerdem, weil sie viel zu
störanfällig
ist.
Literatur: Laborbücher Chemie
Herbert Daecke
Chromatographie


Und
hier noch mein
persönlicher Tipp
für Sie, weil Sie meine
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Die wichtigsten
Schüssel
zur körperlichen Gesundheit
sind: